2.1 Matériel végétal

2.2 Analyses des données

3.1 Analyse de variance

3.2 Analyse factorielle

L’analyse en composante principale (ACP), basée sur 29 caractères morphologiques de l’appareil végétatif et cinq caractères morphologiques de l’appareil reproducteur, montre une divergence des clones au sein de chaque cultivar et saïr (Figs 3 et 4).

3.3 Classification hiérarchique

Les analyses que nous avons entreprises sur les vitroplants de palmier dattier nous ont permis de révéler une grande hétérogénéité dans les caractères morphologiques des clones. Les variations observées sont importantes et très hautement significatives entre les clones d’un même cultivar ou saïr. Ces résultats confirment le taux de polymorphisme enzymatique élevé, trouvé chez les mêmes cultivars et saïrs 〚18〛.

Certains auteurs écartent quelques caractères, notamment la longueur et l’épaisseur du stipe, parce qu’ils sont tributaires de plusieurs facteurs, tels que l’âge du palmier, le poids de rejet lors de la plantation et l’effet de la sécheresse 〚19, 20〛. Dans notre cas, tous les vitroplants, ayant le même âge, sont cultivés dans les mêmes conditions écologiques et reçoivent le même entretien, dans une station expérimentale.

Cette étude d’identification de clones de palmier dattier issus de culture in vitro semble n’avoir jamais été réalisée. Toutefois, le choix d’un nombre élevé de caractères morphologiques discriminants et stables s’avère indispensable pour s’assurer de la fiabilité de la caractérisation morphologique. Les travaux antérieurs relatifs à la morphologie du palmier dattier se basant sur de simples observations, la discrimination de tel ou tel caractère est établie d’une façon subjective, comme le fait de différencier l’importance des caractères par des termes tels que bon caractère, caractère assez fidèle ou caractère intéressant 〚21〛. Certains auteurs ont énuméré un nombre élevé de critères dont la probabilité d’être discriminants est grande 〚22–24〛. D’autres ont eu recours à des traitements statistiques unidimensionnels et n’ont utilisé qu’un nombre réduit de variables (4 à 15 caractères) 〚25〛.

En considérant tous les caractères quantitatifs étudiés, la discrimination est liée à 12 caractères de l’appareil végétatif :

• • hauteur et diamètre du stipe,
• • gabarit de la palme au milieu,
• • longueur totale de la palme, de la partie foliolée et épineuse,
• • épaisseur des épines en haut et au milieu,
• • longueur et largeur de la foliole à la base,
• • densité d’implantation des épines et des folioles,

et à cinq caractères de l’appareil reproducteur :

• • nombre de régime,
• • longueur de la spathe,
• • largeur de la spathe,
• • nombre d’épillets par régime,
• • nombre de dattes par épillet.

Nos résultats sont en accord avec ceux trouvés pour 26 cultivars de palmier dattier de Zagora, sur la base d’un traitement statistique multidimensionnel 〚13〛. Parmi les caractères de l’appareil reproducteur, deux ont été cités dans des travaux antérieurs, réalisés sur le palmier dattier, il s’agit de la longueur de la spathe 〚21〛 et de la longueur de la spathe et du nombre des épillets 〚13〛. La hiérarchie basée sur les caractères de l’appareil végétatif ne conduit pas forcément à la même hiérarchie que celle faite sur les caractères de l’appareil reproducteur. Cependant, la non-concordance des caractères floraux et végétatifs n’implique pas que la classification soit fausse 〚26〛.

Les variations morphologiques révélées chez les vitroplants de palmier dattier suggèrent l’influence de la technique de culture in vitro utilisée. En effet, plusieurs facteurs, sources de variations somaclonales, sont liés à la technique de culture des tissus de palmier dattier, à savoir, entre autres : la durée de la culture in vitro et, plus précisément, la longueur de la phase non morphogène 〚27, 28〛, les désordres physiologiques dus aux substances de croissance mutagènes 〚29, 30〛 et l’origine de l’explant mis en culture 〚31〛. Ces aspects rentrent dans ce qu’on peut appeler la maîtrise de la technique de culture in vitro du palmier dattier. En effet, aucun acquis dans le domaine de l’amélioration ne pourra être exploité d’une manière stable et définitive sans la parfaite maîtrise de la voie de régénération conforme. Rappelons que la conformité génétique n’est garantie que lorsque le développement provient de méristèmes axillaires, comme en conditions naturelles. La technique de régénération employée ne fait pas intervenir les bourgeons axillaires, mais des bourgeons néoformés à la base de jeunes feuilles de cœurs de rejets. Cette technique peut être sujette à des variations somaclonales à cause du passage par le stade cal 〚32〛. Cependant, la voie des axillaires demeure peu rentable, vu leur nombre restreint sur les rejets. L’utilisation des inflorescences comme source d’explants reste intéressante, des études histologiques ont montré que l’initiation des bourgeons se fait au niveau de la zone méristématique sous-épidermique des pétales 〚30〛. Cette technique serait donc en faveur d’une stabilité génétique des vitroplants.

L’étude des caractères morphologiques et la recherche de descripteurs permettant la caractérisation clonale des vitroplants de palmier dattier constituent des étapes préliminaires nécessaires pour mieux promouvoir le secteur phœnicicole. Les résultats de telles recherches permettraient de vérifier la conformité de plants de palmier dattier obtenus par micropropagation in vitro.

The culture of date palm (Phoenix dactylifera L) has an important impact on the economic and cultural sectors for many populations in southern Morocco. It contributes to the conservation of a fragile ecosystem, threatened by the Bayoud disease (fusariosis caused by Fusarium oxysporum f. sp. albedinis) and drought. Because of the very limited number of offshoots produced by date palm in its entire life span, mass propagation can only be accomplished by the use of in vitro culture. In Morocco, production of date palm vitroplants is accomplished through organogenesis (from primordial leaves surrounding the shoot tip of the young offshoots), which allows a certain varietal authenticity instead of the technique of somatic embryogenesis, which is subject to genetic variations. However, the observation of vitroplants in the field, after 10 years of culture, allowed us to register many morphological abnormalities. The aim of the present work is to estimate the intraclonal variability of date palm vitroplants with the help of morphological markers related to the vegetative and reproductive developments.

The measures made on the vegetative and reproductive characters differ between clones within each cultivar and saïr studied. The ANOVA test and t-test indicate that all characters exhibit significant differences between the clones of the cultivar S35. Only 21 characters (except lFM, LEB) for BFG clones, 20 characters (except LEB, EEB and NGd) for the S16b clones, 18 characters (except LEP, GPH, GPB, LEB and EEB) for JHL clones, and 19 characters (except LEP, GPH, lMR, LFB and lFB) for BSK clones, showed significant differences.

The principal component analysis (PCA) based on 34 morphological characters, the vegetative and reproductive aspects, showed a difference of clones into each cultivar and saïr. The analysis of correlation matrices leads to many strongly correlated variables (r = 0.9). Correlation between variables, projected in the plans formed by the axes (1–2 and 1–3), showed a group forming the majority of these variables on the axis (1), which contributes to a high percentage of variance. Using hierarchical classification, the truncation of the hierarchy has been found to be different at the level of the two character sets (vegetative and breeder). It leads respectively to seven and five classes for BFG and S16b, seven and seven classes for S35, while for each of JHL and BSK cultivars, which were not yet fruit producing, the classification exhibited five classes, according to the vegetative criteria.

The different analyses revealed a high heterogeneity in the morphological characters of date palm clones. The observed variations are important and very highly significant between clones of the same cultivar or saïr. By considering all the studied quantitative characters, the discrimination is bound to 12 and five characters of the vegetative and reproductive criteria, respectively.

The morphological variations revealed in the date palm vitroplants suggest the effect of the technique used. The technique does not use axillary buds, but buds neoformed on the bases of very young leaves. This technique can be subject to somaclonal variations, because of the passage by the callus stage. The use of young inflorescences as source of explants remains interesting. Histological studies showed that the initiation of buds is made at the level of the subepidermic meristematic zones of the petals. So, this technique could lead to a genetic stability of date palm vitroplants. The study of the morphological characters and the search for descriptors allowing the clonal characterisation of date palm vitroplants constitute a preliminary and necessary step to improve the date palm culture. The results of such works should allow early tests of the genetic conformity in date palm plants obtained by in vitro micropropagation techniques.