2.1 Extraction des huiles essentielles

Les feuilles des espèces Ocimum (O. canum et O. gratissimum) ont été récoltées à Dimbokro et les graines de Monodora myristica ont été ramassées à Bondoukou, respectivement au centre et au Nord-Est de la Côte-d'Ivoire.

Les huiles ont été obtenues par hydrodistillation des feuilles à l'aide d'un distillateur de type Clevenger pendant environ 3 h. Elles ont été conservées au congélateur (–8 °C) avant leur utilisation pour les différents tests.

2.2 Composition chimique des huiles essentielles

L'analyse des échantillons a été réalisée à l'aide d'un chromatographe de type Delsi 121c équipé d'une colonne CPWAX52Cb de 25 m de longueur et de 0,25 mm de diamètre. La température du four a été programmée à 50 °C pendant 5 min, puis augmentée de 2 °C/min jusqu'à 220 °C. Les températures de l'injecteur et du détecteur sont maintenues respectivement à 240 °C et 225 °C. Le gaz vecteur est l'azote. Le spectromètre de masse est un appareil de type HP 5970300.

2.3 Étude antibactérienne

À partir d'une culture bactérienne de 18 h sur la gélose Mueller Hinton, nous avons réalisé un bouillon de 3 h. Celui-ci a été repiqué dans 10 ml de bouillon Mueller Hinton, selon le protocole décrit par Allegrini et al. [7]. L'eau et le DMSO ont été les solvants utilisés. Les CMI (concentration minimale inhibitrice) et les CMB (concentration minimale bactéricide) ont ensuite été calculées [8].

3.1 Analyse des huiles essentielles

Le Tableau 1 présente les résultats de l'analyse des huiles essentielles des trois plantes qui ont fait l'objet de notre étude. Les composés majoritaires sont en gras. Parmi ceux-ci, on retrouve :

• • le p-cymène le thymol et le β-myrcène, présents dans les trois plantes ;
• • le terpinène-4-ol, fortement présent dans O. canum ;
• • l'α-phéllandrène et le (2-méthoxypropyl)benzène, qui se retrouvent uniquement dans M. myristica ;
• • le β-caryophyllène, présent dans O. gratissimum et dans O. canum.

3.2 Tests antibactériens

Les valeurs des concentrations minimales inhibitrices et bactéricides sont reportées dans les Tableaux 2 et 3. L'huile essentielle de O. canum exerce une action sur toutes les bactéries étudiées.

4.1 Composés chimiques à activité antibactérienne des huiles essentielles

Mazura [9] et Amvam [10] ont attribué l'activité antibactérienne, antifongique des huiles essentielles aux composés chimiques présents dans le Tableau 4. Ce tableau présente les différentes proportions de ces composés par rapport à la composition chimique de nos huiles essentielles.

L'huile essentielle de O. gratissimum est la plus riche en composés antibactériens et antifongiques (54,32%) (Tableau 4). Dans l'échantillon de O. canum, les α- et γ-terpinènes (5,94%) et l'hydrate de sabinène (5,51%) sont les plus importants composés chimiques à action antibactérienne, tandis que les HE de O. gratissimum et de M. myristica doivent leur fort taux en composés antibactériens et antifongiques au p-cymène (respectivement 46,40% et 32%). La proportion de thymol (4,13%) n'est pas aussi négligeable chez O. gratissimum.

4.2 Activité antibactérienne

Toutes les bactéries, à l'exception de Citrobacter koseri et de Pseudomonas. aeroginosa, sont très sensibles à l'essence de Ocimum canum (CMI < 2 mg ml^–1 et CMB < 3,5 mg ml^–1) (Tableau 3).

Quant à l'HE de Ocimum gratissimum, trois tendances se dégagent.

• • Lorsque les CMI sont inférieures à 2 mg ml^–1, on est en présence de Serratia marsescens, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, E. coli, Enterobacter agglomerans, Citrobacter freundii, et Salmonella sp. Ces bactéries sont les plus sensibles à cette essence. Pour les CMI comprises ente 2 et 3,5 mg ml^–1, nous avons Klebsiella ozaenae et Proteus sp. Ces deux bactéries sont moins sensibles que les premières. L'effet antibactérien de cette huile diminue (CMI > 6 mg ml^–1) quand il s'agit de Acinetobacter baumanii, Citrobacter koseri, Enterobacter aerugenes et Enterobacter cloacae. Les mêmes tendances sont observées au niveau des CMB, mais avec des valeurs légèrement supérieures à celles des CMI en ce qui concerne chaque germe (Tableau 2).
• • Les bactéries les plus sensibles à l'essence de Monodora myristica (CMI = 2 mg ml^–1) sont E. agglomerans et Salmonella sp. Lorsque les CMI de cette huile sont comprises entre 2 et 3,5 mg ml^–1, les bactéries concernées sont Acinetobacter baumanii, Citrobacter freundii, Citrobacter koseri, Klebsiella ozaenae et Serratia marsescens.

Chez les autres bactéries, c'est-à-dire Acinetobacter baumanii, Citrobacter freundii, Citrobacter koseri, Klebsiella ozaenae et Serratia marsescens, l'huile essentielle de Monodora myristica possède des concentrations minimales inhibitrices très grandes (supérieures à 6 mg ml^–1) par rapport à celles déterminées sur les premières bactéries. Toutes les CMB sont supérieures à 2 mg ml^–1. Cette huile essentielle est donc moins bactéricide.

4.3 Relation entre activité antibactérienne et composition chimique des huiles essentielles

Nous pouvons attribuer l'action de O. canum sur les bactéries à la présence de l'hydrate de sabinène (5,51%), du sabinène (0,13%), du thymol (2,33%), du p-cymène (2,04%) et des α- et γ-terpinènes (5,94), celle de O. gratissimum à l'action conjuguée du p-cymène (46,4%), du thymol (4,13%), de l'hydrate de sabinène (1,77%), du carvacrol (0,05%) et des α- et γ-terpinène (1,84%).

Ce constat nous amène à conclure que l'action inhibitrice des HE des deux espèces de Ocimum est due à la présence de p-cymène et de sabinène, contrairement à l'action bactéricide, qui peut être attribuée au fort taux en hydrate de sabinène, thymol et α- et γ-terpinènes.

Le Tableau 5 présente les valeurs du rapport CMB/CMI pour chaque huile étudiée. Nous avons ainsi classé les activités des huiles essentielles en deux groupes : celles qui sont bactéricides et celles qui sont bactériostatiques (voir Tableau 6).